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特殊免疫研究所 / 富士フイルム和光純薬 ID: J01059

CRISPR/Cas9による遺伝子改変動物作製 ID: J01059

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哺乳培養細胞やあらゆる動物のゲノムを編集できる『CRISPR/Casシステム』で短期間の内に遺伝子変異モデル動物を作製致します。

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サービスについて

概要（fig.1）

2013年に登場した『CRISPR/Casシステム』は、哺乳培養細胞やあらゆる動物のゲノムを編集できるシステムとして、瞬く間にライフサイエンスの中心技術となりました。短期間の内に遺伝子変異モデル動物を作製できます。またこれまで作製することが非常に困難であったラット等の動物種にも利用できます。
特殊免疫研究所ではBroad InstituteよりCRISPR/Cas9システムの使用ライセンスを所得しています。

fig.1 CRISPR/Cas9システム概念図

特長

  • ノックアウト / ノックイン動物作製可能
  • 塩基置換モデル動物が作成可能
  • マウスのほかラットにも対応

サービス内容

  • 作製事例

    一塩基置換ノックインラット作製

    実験条件
    ラット系統　Wistar系
    標的遺伝子　ROSA
    注入条件　Cas9mRNA / gRNA / ssODN　100 / 50 / 100（ng/μL）

    受精卵細胞質注入
    注入数生存数移植数産仔数
    141個131個122個35匹
    Rosa領域に点変異（EcoRV）を挿入したノックインラット（ホモ個体）のシークエンス確認結果
    シークエンスサンプル： ホモ候補のゲノムDNAをテンプレートにPCRを行い、得られたPCRプロダクトをダイレクトシークエンスした。（fig.2）

    fig.2 一塩基置換ノックインラット作製事例

    遺伝型解析　ssODNとして導入した制限酵素
    　　　　　　サイトを利用
    　　　　　 PCRスクリーニング
    実験結果　変異体取得35匹中12匹（移植胚あたりで約10％）
    　　　　　　ノックイン個体10匹（●）　そのうち2匹がホモ変異体（●）

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参考価格・納期

遺伝子変異 indelタイプ作製（標準作業 Basicプラン：遺伝子変異個体納品）

作業工程作業内容価格（税抜）納期
マウスラット
工程1受精卵への注入物質の準備
gRNA配列設計
CRISPR/Cas9発現ベクターの準備
gRNAおよびCas9 mRANの調製		￥450,0003ヶ月
工程2インジェクション作業
受精卵細胞質注入 100個
作業中の動物維持費（12週間）		￥900,000￥1,150,000
工程3ファウンダー産仔の遺伝子型解析
サーベイヤー 20検体分		￥400,000
合計￥1,750,000￥2,000,000
遺伝子変異 塩基置換モデル作製（標準作業 Basicプラン：遺伝子変異個体納品）

作業工程作業内容価格（税抜）納期
マウスラット
工程1受精卵への注入物質の準備
gRNA配列設計
ssDNAデザイン
CRISPR/Cas9発現ベクターの準備
gRNAおよびCas9 mRANの調製		￥550,0003ヶ月
工程2インジェクション作業
受精卵細胞質注入 200個
作業中の動物維持費（12週間）		￥1,250,000￥1,500,000
工程3ファウンダー産仔の遺伝子型解析
PCR-RFLP 20検体分		￥450,000
合計￥2,250,000￥2,500,000

関連サイト

  • ※価格及び、サービスの仕様・内容などにつきまして、予告なしに変更されることがあります。
  • ※表示している参考価格は消費税等は含まれておりません。
  • ※受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。その他の目的（医療品・食品の製造・品質管理や医療診断など）には使用しないで下さい。
  • ※納期は参考納期です。諸事情により、前後する場合がございます。納期の詳細については個別にお問い合わせください。
  • ※会社名・サービス名などは、各社の商標・登録商標です。
  • ※納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合があります。
  • ※ヒト臨床サンプルの場合はインフォームドコンセントを得ていることをご確認ください。 ヒト由来のサンプルの場合、ご所属の組織の倫理委員会などで承認が得られたものが受領されます。
  • ※人間への感染性が疑われるサンプルに関しては、お受けできない可能性がございます。
  • ※サンプルの保管および返却を行っていない場合があります。お客様より提供いただいたサンプルおよび解析データ等は、業務終了後、廃棄される場合がございます。

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