概要

RayBiotech社製 Quantibody^® Arraysを用いて、Inflammation関連タンパク質、Th1/Th2関連サイトカイン、血管新生（Angiogenesis）関連タンパク質の発現を、各10～60種類づつ（それぞれの代表的なタンパク質）、定量的に解析を行います。

特長

• 1枚のスライドに、16個のアレイが配置されており、各アレイには、それぞれ10～60種類のサイトカインに対する抗体、ポジティブコントロール、ネガティブコントロールが4重にスポットされています。8アレイをブランクおよびスタンダードに使用し、残りの8アレイで10～60種類の試料を定量できます。
• 蛍光で検出するため、化学発光法や比色法よりも高い再現性（CV＜20%）で定量できます。
• 様々な試料（細胞培養上清、血清、血漿、細胞・組織ライセート）に対応します。

サービス内容

• 測定原理（fig.1）

fig.1 測定原理
• ラインナップ
  
  詳細はフィルジェンのHPでご確認ください。
• 実験の流れ
  
  
  1. 血清・血漿・細胞培養液、あるいは組織や細胞などから、タンパク質を抽出
     お送り頂いた、血清・血漿・細胞培養液、あるいは組織や細胞などから、タンパク質を抽出します。
  2. タンパク質の品質チェック
     抽出したタンパク質量を、BCA（Bicinchoninic Acid）法により確認します。
  3. タンパク質の添加及び洗浄
     タンパク質をアレイにアプライし、その後洗浄します。
  4. ビオチン標識2次抗体のミクスチャーの添加及び洗浄
     ビオチン標識した2次抗体のミクスチャーをアプライし、その後洗浄します。
  5. 蛍光標識ストレプトアビジン添加及び洗浄
     蛍光標識したストレプトアビジンをアレイにアプライし、その後洗浄します。
  6. スキャンニング
     GenePix^® 4400Aにて、蛍光発光画像を読み取ります。
  7. 画像データ解析
     GenePix^® で読み取った画像データから、Array-Pro Analyzer^® にて、数値データ（Excel）に変換します。
     数値化データをもとに、解析作業を行い、データをCDに収めてご報告します。
  8. データCD発送
     データCDを秘密保持のために厳重に梱包し、直送あるいは、代理店様へ発送致します。

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必要サンプル量

サンプル	ご送付量	サンプル調整方法
細胞	＞5×10e6個	細胞をPBS1mLで2回洗浄後、上清を捨てて回収したペレットを、液体窒素で凍結後、-80℃以下に保存。
組織	＞50mg	新鮮な組織をチューブに入れ、液体窒素で凍結後、-80℃以下に保存。
細胞培養上清	200μL以上（min.100μL)	細胞培養液を回収後、遠心により固形物を除去し、分注してすぐに-20℃以下に保存。 凍結融解の繰り返しは避けてください。
血清	100μL以上（min.100μL)	血清分離用チューブで回収するか、血液を30分おいて凝固させ、1,000×gで15分遠心後、分注してすぐに-20℃以下に保存。 凍結融解の繰り返しは避けてください。
血漿	100μL以上（min.100μL)	採血後30分以内にEDTA、ヘパリン、クエン酸などの抗血液凝固剤で処理した血液を1,000×gで15分遠心後、分注してすぐに-20℃以下に保存。 凍結融解の繰り返しは避けてください。

＊ 細胞培養上清サンプルでは、血清フリー培地でのサンプル調整を推奨致します。（血清はサイトカインを多少含んでいるため。）
　細胞培養上清に血清が含まれる場合、コントロールに同じ血清を含む培地をご用意ください。
＊ 血清や血漿サンプルは、ご指定がない場合は、2倍希釈して解析を行います。
　 サンプルによっては、検量線から大幅にずれた値を示すことがあり、その場合、正確な定量ができなくなります。
　 追加実験は有償となりますので、原液サンプルと段階的に希釈したサンプルでの解析をお勧めいたします。