特長
- 清型1、2、5、6、8さらにタカラバイオ独自のCereAAVから目的にあったAAVベクターを選択可能
- タカラバイオ独自のAAVベクター抽出法により高純度ウイルスベクター液を作製
- 1012 vg（vector genomes）以上の高力価ウイルスをご提供
概要
アデノ随伴ウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。
- 拡散防止措置P1の施設でも取扱いが可能
- 増殖 / 非増殖のいずれの細胞にも遺伝子導入が可能
- 免疫原性が低く、動物個体への遺伝子導入に最適
- 非分裂細胞にて長期間の発現が可能
タカラバイオでは、高力価、高純度のアデノ随伴ウイルスベクターを作製いたします。精製工程なしの粗抽出液のご注文も可能ですのでお申し付けください。
タカラバイオ独自の脳指向性遺伝子治療用ベクターCereAAV™を受託メニューとして新たにラインナップ
受託ご依頼の際、血清型の一つとして、CereAAVを選択していただくことが可能です。
CereAAVは、AAV2をベースに遺伝子工学的改変と独自スクリーニング技術により、脳指向性を高めた血清型です。静脈注射により投与した動物試験において、CereAAVは血液脳関門を透過し、AAV9と比較して脳への遺伝子導入効率がマウスで50倍以上高いことを確認しています。
サービス内容
アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクター作製
・必要量（AAV作製スケールにより異なります）のプラスミドベクターをご提供いただき、AAVベクターを一過性に産生、細胞ペレットと培養上清からAAVベクターを抽出し、ろ過
・クロマトグラフィー精製後、さらに超遠心精製により中空粒子を除去
・PBSに溶媒交換し、0.22μmフィルター処理後に充填
・
AAVpro Titration Kit（for Real Time PCR）Ver.2（製品コード 6233）を用いたリアルタイムPCR法により、充填後のAAVベクターのゲノムコピー数（力価）を算出
＊タカラバイオが取扱うAAVベクター以外を使用する場合は、予めご相談ください。
＊ウイルスベクターの力価は、測定方法により異なります。また、ウイルスベクター液の組成、測定に使用する細胞や血清などの影響により、同じ方法であっても施設によって異なることがあります。ご了承ください。
【オプションサービス】
プラスミドDNA調製
・目的遺伝子を挿入した発現プラスミドDNA（pAAV-GOI vector）を作製（＊1）
・挿入遺伝子のサイズ（＊2）、挿入接続部位の塩基配列を確認
＊1
AAVpro Helper Free System（製品コード 6673、6230、6650、6651、6680）に含まれるpAAV-CMV Vectorを使用に含まれるpAAV-CMV Vectorを使用
＊2 pAAV-CMV VectorのMCSに挿入可能な遺伝子長は2.5kbまで（5’ ITRから3’ ITRを含め最大4.7 kb）
・ウイルスベクター調製用プラスミドDNAの大量調製（＊3）
＊3 CereAAVをご依頼の場合、プラスミドDNA（pRC Vector）は納品されませんので、予めご了承ください。
| サービス項目 |
価格（税抜） |
納期 |
| アデノ随伴ウイルスベクターの作製 |
￥3,400,000～（＊1） |
12週間 |
（オプション）
プラスミドDNAの調製 |
￥170,000～/件
＊ 遺伝子長で変動 |
4～7週間 |
＊1 培養のスケールアップや精製方法など、ご相談により作業内容の変更が可能です。
＜作業仕様＞
・アデノ随伴ウイルスベクター生産培養、培養面積5,160 cm2～（T225フラスコ23枚程度）
・細胞ペレットと培養上清からのアデノ随伴ウイルスベクター抽出
・クロマトグラフィー精製後、超遠心精製
・精製アデノウイルスベクターの溶媒交換（PBSに交換）
・0.22 μmフィルター処理後充填
・AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2（製品コード 6233）を用いたAAVゲノムタイター測定
・作業報告書作成
