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聖路加エスアールエル先端医療研究センター / 富士フイルム和光純薬 ID: J01635

マスサイトメーター（Helios）によるマルチパラメータータンパクの解析（CyTOF解析） ID: J01635

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1細胞由来のタンパク質発現を抗体と安定同位体標識された金属元素を組み合わせ30マーカー以上を同時解析します。

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サービスについて

特長

  • 細胞を1細胞レベルで高速に解析をするフローサイトメトリーと、元素の質量に基づいて物質を高次元、高分解能で解析できるICP-TOF-MSを融合した『マスサイトメトリー』の技術を応用しています。
  • マスサイトメーターによるタンパクの検出は、目的タンパクに特異的に結合する抗体をプローブに用い、この抗体には金属元素の安定同位体が標識されています。
  • 金属元素の安定同位体による検出は質量を用いるため、各々の同位体に固有の離散値で、シャープなピークとして検出される。
    このため30種類以上のパラメーターを超える抗体を同時に測定する場合であっても『コンペンセーション』が不要です。

サービス内容

測定原理（fig.1）

  • 純度99.999％のアルゴンガスを6,000℃で燃焼することにより誘導結合プラズマ（ICP）を発生させます。
  • 金属で標識した細胞をICPにより燃焼し、1細胞単位でイオン化します。
  • 4重極型イオントラップでクリーニングし、TOF-Massにより質量解析を行います。
  • FCSファイルより専用ソフトを用いてデータを解析

fig.1 測定原理
新たな免疫細胞プロファイリング専用キット（fig.2）

The Maxpar Direct Immune Profiling Assay（DIPA）

  • ヒトPBMCおよび全血の免疫プロファイリングのために開発
  • 凍結乾燥により30種類の標識抗体を容器に固定
  • 37種類のポピュレーションを同時解析
  • 専用解析ソフトウェアによる信頼性の高いデータを提供

ターゲットポピュレーション マーカー一覧
Population 抗体種類（30種類）
Monocytes classical Antibody Clone Mass
transitional CD45 HI30 89Y
nonclassical CD196/CCR6 G034E3 141Pi
Dendritic cells myeloid CD123 6H6 143Nd
plasmacytoid CD19 HIB19 144Nd
Granulocytes neutrophils CD4 RPA-T4 145Nd
CD66b- neutrophils CD8 RPA-T8 146Nd
basophils CD11c Bu15 147Sm
eosinophils CD16 3G8 148Nd
Lymphocytes NK early CD45RO UCHL1 149Sm
late CD45RA HI100 150Nd
B cells naïve CD161 HP-3G10 151Eu
memory CD194/CCR4 L291H4 152Sm
plasmablasts CD25 BC96 153Eu
CD3＋ Tcell γδ CD27 O323 154Sm
MAIT/NKT CD57 HCD57 155Gd
CD3+/CD4+ naïve CD183/CXCR3 G025H7 156Gd
central memory CD185/CXCR5 J252D4 158Gd
effector memory CD28 CD28.2 160Gd
terminal effector CD38 HB-7 161Dy
Th1 CD56/NCAM NCAM16.2 163Dy
Th2 TCRgd B1 164Dy
Th17 CD294 BM16 166Er
T regulatory cell CD197/CCR7 G043H7 167Er
CD3+/CD8+ naïve CD14 63D3 168Er
central memory CD3 UCHT1 170Er
effector memory CD20 2H7 171Yb
terminal effector CD66b G10F5 172Yb
HLA-DR LN3 173Yb
IgD IA6-2 174Yb
CD127 A019D5 176Yb
Live/Dead Intercalator-103Rh 103Rh

fig.2 新たな免疫細胞プロファイリング専用キット
DIPAのFCSファイルを解析する専用ソフトウェアによる解析

  • Maxpar Pathsetter Softwareによるデータ解析
  • 37種類の免疫細胞サブセットを全自動で解析をすることで、解析者によるデータのバラつきを回避し、包括的な免疫表現型の解析が可能
  • 多種類のレポートの出力が可能なため、PDFやExcelでのエクスポートも可能

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参考価格・納期

サービス項目 価格（税抜） 納期
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