Biointron / ペプチド研究所 ID: J02012

抗体最適化：アフィニティ・マチュレーション ID: J02012

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Biointronは独自のアフィニティ・マチュレーションプラットフォームを開発し、CDR領域内の各アミノ酸に均等な割合で変異させます。少なくとも5倍以上のアフィニティ活性の向上を保証します。

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サービスについて

概要

アフィニティ・マチュレーション（Affinity Maturation）は、まだ親和性成熟といいます。抗体と標的抗原への結合強度を向上させるために使用されます。抗体最適化方法の1つです。これは、哺乳動物のB細胞における体内でのソマティックハイパーミューテーションとクローン選択によって自然に行われますが、治療目的のために実験室内でのミュータジェネシスと選択によっても行われることがあります。

FCMES-AM^™（Full Coverage Mammalian Expression System for Affinity Maturation）は、Biointronの特許プラットフォームです。CDR領域内の各アミノ酸は、システインとメチオニンを除く17種類のアミノ酸に均等な割合で変異させます。クローンは哺乳類系で発現され、最初のテストとしてELISA結合アッセイが実施されます。これに続いて、さらなる親和性測定のためにSPR（surface plasmon resonance）またはFACS（fluorescence-activated cell sorting）が行われます。

特長

CDR領域の非バイアス部位飽和変異導入法
・全てのCDR領域をカバーします。
・その他の17種類のアミノ酸が同じ頻度で出現します。
高効率スクリーニング
・少なくとも5倍以上の親和性向上を保証します。
・アフィニティ・ランキング ELISA/SPR/FACS
短納期
・6～8週間
・哺乳類HTP発現系

作業フローチャート（fig.1）

fig.1 作業フローチャート

サービス詳細

ステップ	詳細	納品物
配列デザイン	・CDR領域におけるノーバイアス部位飽和変異誘発（CDR領域の各アミノ酸について17個のアミノ酸変異体すべて）	/
ホット・スポットの特定	・哺乳類におけるハイスループット発現システム（FCMES-AM^™）・ELISA検出	・ELISA測定結果
ホットスポットの組み合わせ	・哺乳類におけるハイスループット発現システム（FCMES-AM^™）・ELISA検出	・ELISA検出
抗体発現とアフィニティー検出	・抗体発現とアフィニティー精製・Biacore Full KDまたはFACSによるアフィニティ確認	・精製抗体・プラスミド配列・アフィニティー検出結果

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アフィニティ・マチュレーション

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