フナコシ / フナコシ ID: J00401

CRISPR-Cas9システムによる遺伝子改変細胞株の作製受託サービス ID: J00401

CRISPR-Cas9システムを利用し、目的遺伝子をノックアウト/ノックインした細胞株の作製を承ります

サービスについて

概要

ユニーテック(株)では、iPS細胞、がん細胞、不死化細胞など、さまざまな細胞株における標的遺伝子のノックアウトや点変異の挿入、外来遺伝子(cDNA、蛍光タンパク質など)のノックインなどの受託サービスを提供しています。ゲノム上の特定の位置への外来遺伝子のノックインなどをご希望の場合は、相同組換え用のターゲティングベクターの構築のご依頼も承ります。CRISPR/Cas9を用いることにより、高効率に遺伝子改変細胞株を樹立いたします。

ノックアウト細胞株作製

項目概要単位価格(税抜)
①試験計画書作成 試験計画構築、書類作成など 1式 ¥30,000
②細胞培養 細胞培養基本料金 1株 ¥150,000
③標的遺伝子配列確認 標的配列周辺領域(約2kbp, primerの設計および合成を含む)
ダイレクトシークエンス法
1株 ¥120,000
④ゲノム編集用ベクター構築 in vitro切断チェックを含む 1種 ¥550,000
⑤標的遺伝子座の確認 リアルタイムPCR解析(2point) 1種 ¥200,000
⑥標的遺伝子の発現解析 標的遺伝子の半定量PCR 1式 ¥180,000
⑦トランスフェクション 標的細胞にベクターを導入
(リポフェクション法またはエレクトロポレーション)
1株 ¥150,000
⑧ソーティング GFP陽性細胞のソーティング 1種 ¥100,000
⑨1次スクリーニング KO Alleleの検出及びIndel配列の挿入確認(1point、PCR条件検討あり)
[PCR法、ダイレクトシークエンス解析]
1種 ¥250,000
⑩クローン化 限界希釈によるクローニング 1株 ¥300,000
⑪2次スクリーニング ウエスタンブロットまたはELISA法 1種 ¥200,000
⑫3次スクリーニング
(Genotyping)
KO Alleleの検出(1point、PCR条件検討なし)[PCR法] 1種 ¥240,000
KO Alleleの配列確認 [クローニングシークエンス法] 1種 ¥300,000
⑬拡大培養・凍結保存 納品用クローンの拡大培養・凍結保存 1種 ¥100,000
⑭マイコプラズマ検査 PCRによる納品用クローンのマイコプラズマ検査 1式 ¥75,000
⑮最終報告書作成 試験結果のまとめ 1式 ¥30,000
⑯納品 ドライアイス代、輸送費、雑費含む 1回 ¥20,000
合計 ¥2,995,000

ノックイン細胞株作製

点変異の挿入も承っております。
*ノックイン細胞株作製については、お問い合わせ下さい。

トライアル培養

ユニーテック(株)では、多種多様な細胞株を対象としたDNAベクター導入受託サービスの実績があります。その過程においては、標的細胞株の性質により標準的な工程では作製が困難な場合もあります。そのような場合、対象工程を標的細胞株の性質に合わせて変更することで対応が可能になることが多いですが、対応内容によっては作製スケジュールに大きな影響を及ぼすこともあります。そのため、試験開始前に標的細胞株の各工程への適性確認として、トライアル培養の実施をお勧めします。
* 下記作製実績リストに掲載されている細胞株については、トライアル培養は不要です。

項目概要単位価格(税抜)
トライアル培養 DNAベクター導入における各工程への適性確認 1株 ¥180,000

バルク細胞クローニング

DNAベクター導入において、最も障害となり得る工程の一つにクローニング(シングルクローン化)が挙げられます。
DNAベクターの導入では、DNA二重鎖の切断を引き起こすことで、非相同末端結合(non-homologous end joining)や相同組換(homologous recombination)などの修復機構を誘導し、インデル変異やドナーDNAのノックインなどの導入効率を大幅に引き上げています。しかし、特にインデル変異についてはさまざまなパターンで導入されるため、DNAベクター導入後の細胞集団のゲノムは均一ではないことが多くなります。したがって、均一な集団を得るためには、クローニング工程が必要になります。

項目概要単位価格(税抜)
細胞培養 細胞培養基本料金 1種 ¥100,000~
クローニング 限界希釈法その他(最大40クローン) 1種 ¥250,000~
拡大培養・凍結保存 クローンの小スケール凍結保存(最大40クローン) 1種 ¥150,000
試験報告書作成 中間報告書、最終報告書作成など 1試験 ¥25,000
納品 ドライアイス代、輸送費、雑費含む 1回 ¥40,000
合計 ¥565,000~

作成実績

一般的に良く使用される293(HEK293)細胞株をはじめ、様々な細胞株におけるDNAベクター導入実績があります。現在までにDNAベクター導入に成功した主な細胞株については、下表をご覧下さい。記載のない細胞株については、お問い合わせ下さい。

由来種由来組織細胞株名
ヒト DMS 273、NCI-H1048、SBC-5
肝臓 HuH-7
腎臓 293(HEK293)
HCT 116
リンパ球 TK6
多能性幹細胞 iPS
マウス 筋肉 HL-1
MC3T3-E1

ご注文に関して

お問い合わせフォーム よりお問い合わせください。

参考価格・納期

サービス項目 価格(税抜) 納期
CRISPR-Cas9システムによる遺伝子改変細胞株の作製受託サービス 上記をご確認ください お問い合わせ

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